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技術(shù)文章/ARTICLE
ELISA試劑盒土壤樣本到底要怎么處理
點(diǎn)擊次數(shù):2547 發(fā)布時(shí)間:2019/11/5 11:15:18
elisa試劑盒土壤樣本到底要怎么處理
土壤樣本處理一般分為2個(gè)步驟,個(gè)步驟是測定含水率,第二個(gè)步驟是進(jìn)行勻漿,按照10%混勻離心取上清待檢。具體操作如下。
部分:
1、稱取土壤500mg左右,必須保持鮮重,按照重量和體積比加入1:10的PBS溶液(PBS的濃度為0.01mol/L,PH控制在7.2-7.4),例如稱取的是0.5g加入5ml的PBS,稱取的重量不要求保持一致,但勻漿的比例都是按照1:10的關(guān)系來。
2、進(jìn)行渦旋震蕩,充分混勻,渦旋時(shí)間30秒
3、離心取上清,離心轉(zhuǎn)速為4000轉(zhuǎn)每分,時(shí)間為15分鐘左右,取上清液待檢
第二部分:
稱取500mg左右的樣本,進(jìn)行烘干,前后稱取重量,測定含水率。(這個(gè)是為后期剔除掉含水率)
備注:除了土壤樣本其他類型樣本處理同樣需要正確處理,下面是其他樣本的處理方式:
1. 血清:
室溫血液自然凝固10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
2. 血漿:
應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA、檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合10-20分鐘后,離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
3. 尿液:
用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照此實(shí)行。
4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
檢測分泌性的成份時(shí),用無菌管收集。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。
5. 培養(yǎng)細(xì)胞
檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時(shí),用PBS(PH7.2-7.4)稀釋細(xì)胞懸液,細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融或加入組織蛋白萃取試劑,以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成,應(yīng)再次離心。
6. 組織標(biāo)本
切割標(biāo)本后,稱取重量。加入一定量的PBS,PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆。?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS(PH7.4),或組織蛋白萃取試劑, 用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿化。離心20分鐘左右(2000-3000轉(zhuǎn)/分)。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測,其余冷凍備用。
1,對于樣本要求保持鮮重
2,稱取樣本中的重量不小于50mg,一般以1g為基準(zhǔn)
3,勻漿的比例選取10%,相當(dāng)于1g組織加9ml的勻漿液來進(jìn)行勻漿
4,勻漿液選取PBS(PH=7.2-7.4,濃度為0.01mol/L)
選用組織勻漿器或者碾缽進(jìn)行組織勻漿!
原創(chuàng)作者:上海臻科生物科技有限公司